中文名称:MLL-AF9诱导高表达IRF7小鼠髓细胞白血病模型
英文名称:NA
类型:白血病动物模型
分级:NA
用途:用于白血病研究。
研制单位:中国医学科学院血液病医院
保存单位:中国医学科学院血液病医院
一、疾病名称
白血病
二、临床发病机制及症状
急性髓细胞性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病。以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征,临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等。
SPF级6-8周龄鼠,C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。
1. 病毒准备
细胞:293T
表达载体:MSCV- MLL-AF9 -IRES-GFP,MSCV-IRF7 -IRES-BFP。
2. 实验动物
可使用SPF级别的6-8周龄鼠, C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。
3. 细胞准备:
取B6.SJL小鼠的骨髓细胞,利用C-kit+磁珠,富集C-kit+造血干祖细胞
4. 病毒感染
富集的小鼠C-kit+造血干祖细胞,体外感染表达MSCV- MLL-AF9-IRES-GFP的逆转录病毒,感染后培养48h。
5. 细胞回输
感染后的C-kit+造血干祖细胞利用流式细胞仪分选出GFP+的细胞,通过尾静脉注射到致死剂量照射的C57BL/6J小鼠体内,每周检测GFP+细胞的比例。
6. 病毒二次感染及回输
当检测到小鼠外周血GFP+细胞的比例超过50%,处死小鼠,取小鼠骨髓细胞,
(1) 症状观察
细胞回输后小鼠症状表现为:竖毛、弓背。
(2) 流式检测
在细胞回输后的一周后,每周检测外周血GFP+ BFP+细胞的比例,有出现GFP+ BFP+细胞,即为模型成功。
1. 动物症状观察
表现为体重减轻、弓背竖毛,在回输后的一个月后死亡。
2. 细胞表型
流式检测结果显示,细胞免疫表型为CD3-CD19-Gr-1+CD11b+