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中析检测

MLL-AF9诱导高表达IRF7小鼠髓细胞白血病模型

原创版权
咨询量:  
更新时间:2025-03-16  /
咨询工程师

模型信息

中文名称:MLL-AF9诱导高表达IRF7小鼠髓细胞白血病模型

英文名称:NA

类型:白血病动物模型

分级:NA

用途:用于白血病研究。

研制单位:中国医学科学院血液病医院

保存单位:中国医学科学院血液病医院

研究背景

一、疾病名称

白血病

二、临床发病机制及症状

急性髓细胞性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病。以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征,临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等。

制备方法

SPF级6-8周龄鼠,C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。

1. 病毒准备

细胞:293T

表达载体:MSCV- MLL-AF9 -IRES-GFP,MSCV-IRF7 -IRES-BFP。

2. 实验动物

可使用SPF级别的6-8周龄鼠, C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。

3. 细胞准备:

取B6.SJL小鼠的骨髓细胞,利用C-kit+磁珠,富集C-kit+造血干祖细胞

4. 病毒感染

富集的小鼠C-kit+造血干祖细胞,体外感染表达MSCV- MLL-AF9-IRES-GFP的逆转录病毒,感染后培养48h。

5. 细胞回输

感染后的C-kit+造血干祖细胞利用流式细胞仪分选出GFP+的细胞,通过尾静脉注射到致死剂量照射的C57BL/6J小鼠体内,每周检测GFP+细胞的比例。

6. 病毒二次感染及回输

当检测到小鼠外周血GFP+细胞的比例超过50%,处死小鼠,取小鼠骨髓细胞,

评价验证

(1) 症状观察

细胞回输后小鼠症状表现为:竖毛、弓背。

(2) 流式检测

在细胞回输后的一周后,每周检测外周血GFP+ BFP+细胞的比例,有出现GFP+ BFP+细胞,即为模型成功。

生物安全性

实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准(ILAS-GC-2012-001)。

讨论与结论

1. 动物症状观察

表现为体重减轻、弓背竖毛,在回输后的一个月后死亡。

2. 细胞表型

流式检测结果显示,细胞免疫表型为CD3-CD19-Gr-1+CD11b+

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